ELISpot（酶联免疫斑点法，Enzyme-Linked ImmunoSpot）是一种高度敏感的免疫学检测方法，主要用于定量测定单个细胞的抗原特异性反应。它能够检测并记录特定细胞（如T细胞、B细胞）在面对特定刺激物（如抗原、细菌、病毒等）时所分泌的细胞因子或其他分子。
ELISpot扫板和读板
在ELISpot实验中，“扫板”和“读板”是两个关键的步骤，分别指的是扫描实验板和记录反应结果的过程。具体来说：
1.ELISpot实验基本步骤：
-细胞培养：将目标细胞（例如，免疫细胞如T细胞或B细胞）与特定的抗原或刺激物一起培养，通常在多孔的微孔板中进行。
-细胞因子释放：在特定的条件下，细胞会被激活并分泌细胞因子（如IFN-γ、IL-2等）。这些因子会被捕捉在微孔板上的膜上。
-酶联反应：通过与特异性抗体（通常是针对目标细胞因子的抗体）结合，并与酶底物反应，生成可见的斑点。每个斑点代表一个分泌特定细胞因子的单个细胞。
2.扫板（扫描板）
-扫板是指使用扫描仪或专用设备对ELISpot板（通常是96孔或384孔的微孔板）进行逐孔检查的过程。
-每个孔中可能含有一个或多个分泌特定细胞因子的细胞，酶底物反应后形成可见的斑点，扫板的目的是捕捉这些斑点的位置和数量。
-扫板通常通过图像扫描仪来完成，设备会自动记录板上的斑点，并生成数字化图像。现代的扫板系统能够通过自动化软件帮助识别斑点的位置、大小和形态，从而更准确地统计结果。
3.读板（分析读数）
-读板是指通过扫描后的数据分析，统计每个孔中斑点的数量。
-这些斑点的数量反映了特定细胞因子的分泌量。通常，每个斑点代表一个单一细胞因子的分泌事件，数量越多，表明有越多的细胞在分泌该因子。
-读板过程中，软件会计算每个孔中的斑点数量，并给出实验的定量结果。实验者可以根据斑点数来评估免疫反应的强度。
4.ELISpot的应用
ELISpot技术可以应用于多个领域，如：
-免疫学研究：用于测定免疫细胞（特别是T细胞）对特定抗原的反应，例如检测T细胞的细胞因子分泌，评估免疫反应的强度。
-疫苗研究：评估疫苗接种后的免疫反应，尤其是针对特定病原的细胞介导免疫反应。
-临床检测：监测自身免疫性疾病、感染性疾病或癌症免疫反应中的免疫细胞活动。
ELISpot扫板和读板是ELISpot实验中两个重要的步骤，通过扫描和分析微孔板上的斑点，能够定量测定单个细胞因子分泌的水平，从而提供有关免疫细胞功能和免疫反应强度的宝贵信息。这使得ELISpot成为一种在免疫学、临床研究以及疫苗开发中具有广泛应用的高效检测工具。
更新时间：2025-10-17
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